Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠 | 工具鼠 | 药物筛选评价小鼠模型

产品编号：C001536

品系全称：C57BL/6JCya-Stra8^{em1(P2A-ZsGreen1-T2A-Cre)}/Cya

品系背景：C57BL/6JCya

传代建议：杂合与野生型互配/杂合与杂合互配

品系描述

STRA8基因编码雌性和雄性生殖细胞向减数分裂过渡所需的减数分裂诱导因子，参与减数分裂的激活、细胞对视黄酸的反应以及生殖细胞的发育等多个过程，仅在减数分裂前的生殖细胞中表达。在雌性个体中，STRA8蛋白在胚胎和卵巢中表达；在雄性青春期和成年的睾丸以及减数分裂前的生精细胞中，STRA8蛋白由某些A型和B型精原细胞、前细线体精母细胞和早期细线体精母细胞（蛋白水平）表达，表达开始于晚期未分化的精原细胞，并在分化的精原细胞（蛋白水平）期间持续存在。

Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠是通过基因编辑技术将“P2A-ZsGreen1-T2A-Cre”基因表达元件插入小鼠Stra8基因的终止密码子前，在小鼠Stra8基因调控元件的驱动下表达Cre重组酶所构建的。该构建策略不会影响小鼠内源Stra8基因的表达。当与含有loxP位点的小鼠杂交时，子代可在精原细胞中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。该品系杂合小鼠是可存活且可育的。

构建方式

通过基因编辑技术将“P2A-ZsGreen1-T2A-Cre”元件插入小鼠Stra8基因的终止密码子前，模拟内源基因的表达模式，插入元件不会干扰小鼠Stra8基因的正常功能。

验证数据

检测方法

将Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，以产生双基因杂合的子代小鼠。Cre重组酶介导表达终止元件（LSL）的删除将导致tdTomato蛋白在Cre阳性细胞中的表达。当子代小鼠发育到4周龄时，采集小鼠睾丸和附睾组织并通过免疫荧光（IF）分析tdTomato蛋白的分布，以确定Cre重组酶的表达情况。

实验分组

Cre+: Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]；

Cre-: Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]。

检测结果

Cre重组酶在睾丸中的表达情况

图1. 睾丸中tdTomato蛋白的表达检测。组织学检测结果显示在Cre+小鼠的精原细胞中存在大量tdTomato蛋白的红色荧光信号，显示在此类组织中发生Cre重组。

Cre重组酶在附睾中的表达情况

图2. 附睾中tdTomato蛋白的表达检测。组织学检测结果显示在Cre+小鼠的附睾中存在少量tdTomato蛋白的红色荧光信号，显示在此类组织中发生Cre重组。

总结

在Stra8-P2A-ZsGreen1-T2A-Cre小鼠模型中，Cre重组酶的表达主要集中于精原细胞中，同时在附睾中也检测到部分重组信号。此外，该模型未观察到明显的Zsgreen自发荧光信号（数据未展示）。综上，该模型可用于靶向精原细胞的组织特异性研究。

注意事项

该品系中Cre重组酶基因表达元件整合位点位于小鼠6号染色体上，请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。